Prometheusto zaawansowana platforma analityczna stworzona przez NanoTemper, służąca do kompleksowej oceny stabilności konformacyjnej i kolidialnej białek. Dzięki integracji kilku technik – bez znakowania, w warunkach zbliżonych do natywnych – Prometheus umożliwia badanie termicznej i chemicznej stabilności białek, agregacji, zmian w masie cząsteczkowej i agregacji. To kluczowe narzędzie w rozwoju biologicznych leków, konstrukcji białek rekombinowanych, formulacji i kontroli jakości.
Cechy charakterystyczne:
Prometheus pracuje z bardzo małą objętością próbki – zaledwie 10µL - co czyni go niezwykle wydajnym narzędziem przy ograniczonych ilościach białka.
Obsługa próbki odbywa się poprzez pojedyncze kapilary albo capillarychip, co pozwala na elastyczne przygotowanie zarówno pojedynczych, jak i wielu próbek jednocześnie.
Zakres temperatur, w których można prowadzić eksperymenty, obejmuje od 15 °C do 110 °C, co umożliwia analizę stabilności termicznej białek w szerokim spektrum warunków.
Zakres stężeń białka jest bardzo szeroki – od około 0,005 mg/mL do 250 mg/mL, co pozwala na ocenę stabilności zarówno przy niskich, jak i wysokich stężeniach białka.
Prometheus łączy w sobie kilka technik biofizycznych: nanoDSF (fluorescencja wewnętrzna tryptofanu/tyrozyny, tzw. intrinsic fluorescence), DLS (Dynamic Light Scattering), SLS (Static LightScattering) oraz backreflection/turbidity - co pozwala na jednoczesną ocenę stabilności konformacyjnej białka, zmian w rozmiarze cząstek, skłonności do agregacji i innych parametrów.
Obszary zastosowań:
Stabilność białek rekombinowanych, przeciwciał, białek terapeutycznych – przy opracowywaniu leków biologicznych i charakterystyki białka.
Badania białek trudnych – np. membranowych, agregujących, wymagających detergentów.
Optymalizacja warunków formulacji (bufory, pH, stężenia, dodatki), buffer screening, warunki stabilności przy produkcji i przechowywaniu – ważne w produkcji.
Kontrola jakości i charakterystyka finalnych produktów biologicznych (stabilność, agregacja, zgodność biologiczna).
Prace badawcze: inżynieria białek, badania strukturalne, analiza wpływu mutacji lub zmian warunków na stabilność białek.
Korzyści dla użytkownika
Wysoka rozdzielczość i dokładność danych - nanoDSF pozwala obserwować bardzo subtelne zmiany w środowisku białka, co przekłada się na precyzyjną ocenę stabilności.
Minimalna ilość próbki - 10 µL i szeroki zakres stężeń – oszczędność cennego materiału, co jest istotne przy drogich lub trudno pozyskiwanych białkach.
Wszechstronność - możliwość oceny stabilności konformacyjnej, agregacji, rozmiaru cząstek w jednym eksperymencie, co daje kompletne profile stabilności.
Brak potrzeby znakowania - co upraszcza workflow i eliminuje potencjalne artefakty związane z barwnikami; możliwe analizy w obecności detergentów czy przy membranowych białkach.
Szybkość i automatyzacja - przy użyciu capillary chipów możliwe szybkie i efektywne przetwarzanie wielu próbek, co przyspiesza procesy rozwoju i testowania.