Monolith

Monolith

Monolith to klasyczne i sprawdzone narzędzie do pomiaru oddziaływań molekularnych w roztworze – w oparciu o metodę MicroScale Thermophoresis (MST) oraz uzupełniająco -Spectral Shift. Dzięki temu Monolith umożliwia pomiar powinowactwa, kinetyki, stechiometrii wiązań między białkami, małymi ligandami, kwasami nukleinowymi, a także dużymi kompleksami, zachowując przy tym niskie zużycie próbki. To instrument referencyjny, często używany jako metoda ortogonalna wobec innych technik (SPR, ITC, itp.).   

Cechy charakterystyczne / Dane techniczne 

• Metoda: MicroScale Thermophoresis (MST), możliwe również pomiary z wykorzystaniem Spectral Shift przy odpowiednim znakowaniu.   

• Zakres mas cząsteczkowych: od małych ligandów do bardzo dużych kompleksów (10¹ – 10⁷ Da) – szeroka uniwersalność przy różnych typach interakcji.   

• Zakres powinowactwa (Kd): typowo od nM do mM; przy odpowiednim warunku możliwe pomiary bardzo silnych oraz słabych interakcji.   

• Zużycie próbki: minimalne – kilka μL (np. 7–10 µL na kapilarę), co jest korzystne przy rzadko dostępnych białkach.   

• Buffor / warunki eksperymentalne: pomiary odbywają się w roztworze – blisko warunków natywnych – co pozwala na analizę w obecności buforów, związków, lizatach komórkowych itp.   

• Elastyczność zastosowania: białko–białko, białko–ligand, białko–kwas nukleinowy, duże kompleksy, liposomy, rybosomy – szeroka gama możliwych badań interakcji.   

Obszary zastosowań 

• Badanie interakcji białko–ligand, białko–białko, białko–DNA/RNA, kompleksów – przy badaniach podstawowych, strukturze, funkcji, biochemii. 

• Weryfikacja wyników uzyskanych z innych metod (np. SPR, ITC) jako metoda ortogonalna – potwierdzenie bindingu, eliminacja artefaktów. 

• Projekty z małymi ligandami, fragmentami, inhibitorami, PROTAC, gdzie potrzebne są precyzyjne dane Kd i stechiometrii. 

• Praca z cennymi lub trudno uzyskiwanymi białkami – minimalne zużycie próbki. 

• Analizy w warunkach bliskich natywnym – buforów, obecności detergentów, lizatach -co pozwala na bardziej relewantne wyniki. 

Korzyści dla użytkownika 

• Precyzyjne dane powinowactwa i stechiometrii - MST + Spectral Shift daje możliwość bardzo dokładnej analizy wiązań, nawet bardzo słabych lub skomplikowanych.   

• Minimalna ilość materiału - oszczędność próbki, co jest kluczowe przy drogich lub ograniczonych zasobach.   

• Elastyczność warunków - pomiary w roztworze, przy różnych buforach, środowiskach, co zwiększa biologiczną wiarygodność wyników.   

• Uniwersalność - od małych ligandów do dużych kompleksów: białka, kwasy nukleinowe, liposomy – szeroki zakres zastosowań.   

• Metoda ortogonalna — idealna do potwierdzania wyników z innych technik, co zwiększa pewność i wiarygodność danych.